NASBA тест

NASBA-тест (от англ. Nucleic acid sequence based amplification) – это современная методика диагностирования и наблюдения за терапией разнообразных заболеваний, которые передаются половым путем (сокр. ЗППП), и некоторых других вирусных заболеваний.

Основу методики составляет амплификация молекул рибонуклеиновой кислоты (РНК) возбудителей заболеваний, при участии ферментов обратной транскриптазы, РНК-полимеразы и РНК-азы, в отличие от ПЦР-диагностики (Полимеразной Цепной Реакции), при осуществлении которой обнаруживается ДНК. NASBA-тест был разработан Дж. Комптоном в 1991 году. Сразу после изобретения NASBA, последний был использован для быстрой диагностики и количественного определения ВИЧ-инфекции в сыворотке крови пациента.

Особенности и преимущества

При помощи NASBA-теста можно обнаружить лишь живые клетки, в которых синтезируется рибонуклеиновая кислота в процессе их жизнедеятельности. В противоположность РНК, молекула дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) довольно стабильна и не разрушается после гибели микроорганизмов, поэтому анализ (ПЦР-диагностика) может иметь положительный результат в связи с существованием мертвых клеткок агента и даже их разрушенных элементов. А РНК разнится от ДНК тем, что она очень нестабильна, после гибели возбудителя довольно быстро разрушается, в связи с чем ее определение становится невозможным. Это имеет особенную актуальность после проведения терапии или при существовании сомнений. К примеру, если ПЦР-диагностика совершается не ранее, чем через три-четыре недели после окончания лечения, то NASBA-тест берется через пять-семь дней. Хотя молекулы РНК могут быть также амплифицированы с помощью ПЦР-диагностики с использованием обратной транскриптазы (в целях синтеза комплементарной цепи ДНК в качестве матрицы), основным преимуществом NASBA-теста является то, что он осуществляется в изотермических условиях - обычно при постоянной температуре 41 °С.
NASBA-тест имеет отличительную особенность – очень высокую чувствительность. Всего на одной цепочке дезоксирибонуклеиновой кислоты синтезируется большое количество РНК-молекул, которые в последующем принимают участие в биосинтезе белков в клетках. В связи с этим, число молекул РНК многократно превышает количество ДНК, что существенно облегчает их обнаружение. Это позволяет диагностировать болезнь на самых начальных стадиях, а также в случае вялотекущих хронических реакций, когда не существует выраженных клинических симптомов. Обнаружение в режиме реального времени продуктов амплификации (NASBA-Real-time) с помощью флуоресцентных зондов еще больше увеличивает специфичность методики и объективный характер результатов диагностики.

Объекты исследования

Материал для проведения NASBA-теста может быть следующим:

• соскоб клеток цервикального канала;
• соскоб клеток уретры;
• сперма;
• моча;
• кровь.

Применение NASBA теста

NASBA-тест широко применяется с целью диагностирования и контроля за лечением и его эффективностью следующих половых инфекций:

• трихомониаз;
• гонорея;
• хламидиоз;
• микоплазмоз;
• ВИЧ и СПИД.

Кроме этого, NASBA-тест используется с целью быстрой диагностики в отношении некоторых патогенных вирусов с одноцепочечной молекулой РНК, например:

• вируса гриппа А (H1N1);
• вируса ящура;
• вируса атипичной пневмонии (SARS);
• бокавируса человека (HBoV).

Также методика NASBA нашла свое применение при диагностике возбудителя африканского трипаносомоза (сонной болезни) - Trypanosoma brucei.

СУЩЕСТВУЮТ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ, НЕОБХОДИМА КОНСУЛЬТАЦИЯ СПЕЦИАЛИСТА!